Методика "Определение температурного порога выживаемости растений в летний период на примере изучения процесса коагуляции белков цитоплазмы клеток разных растений".

Работа № 2. Определение температурного порога выживаемости растений в летний период на примере изучения процесса коагуляции белков цитоплазмы клеток разных растений. Методические рекомендации к работе. Клетки   различных   растений   имеют   неодинаковую   устойчивость   к повышению   температуры   в   летний   сезон.   Цель   работы   –   выявить   набор наиболее   устойчивых   к   выживанию   в   жарких   условиях   видов   древесных растений, которые могут быть в дальнейшем использованы для составления ассортимента   древесных   растений   для   озеленения   данной   территории (например,   своей   школы).   Можно   использовать   два   метода   исследования, предложив их параллельное проведение разным исследовательским группам учащихся – метод Вигорова и метод Генкеля. Метод П.А. Генкеля (1 вариант): Температура,   при   которой   в   течение   10   минут   полностью   разрушается (коагулирует)   белок   цитоплазмы,   считается   условной   границей жаростойкости   растения.   Гибель   клетки   устанавливается   по   потере   ими способности к плазмолизу. Оборудование, реактивы, материалы. 1) Микроскоп, 2) большие химические стаканы – 6 штук, 3) пробирки – 5 штук, 4) большая колба, 5) электроплитка, 6) термометр, 7) бритва, 8) препаровальная игла, 9) кисточка, 10) предметные и покровные стекла, 11) кусочки фильтровальной бумаги 12) карандаш по стеклу, 13) 1 М раствор сахарозы, 14) 0,02% раствор нейтрального красного, 15) свежие листья  древесных растений. Ход работы: Острой бритвой срезать в каждую  из 6 пробирок  по 2 свежих  среза эпидермиса   исследуемых   листьев,   добавить   к   этим   срезам   немного водопроводной воды. В большой колбе нагреть воду. Приготовить образцы воды  разной температуры. Нам водяную баню поставить пробирки со срезами с установленной температурой. Температуру на постоянных уровнях можно путем   постепенного   добавления   горячей   воды   к   остывающим   пробиркам. Через 10 минут срезы вынуть, уложить на предметное стекло, промокнуть остатки жидкости фильтровальной бумагой, окрасить красителем бесцветные срезы, нанести раствор глюкозы, закрыть покровными стеклами препараты и рассмотреть под микроскопом через 15 – 20 минут. Знаком «+» обозначить в таблице     наличие   плазмолиза,   а   знаком   «­»   ­   его   отсутствие.   Наличие плазмолиза показывает, что клетка жива, а его отсутствие – гибель клетки. Запись результатов. Название растения Температура 3 4 2 5 3 8 4 0 … 50 … Построить   ряд   устойчивости   разных   растений   по   температурному   порогу коагуляции цитоплазмы. Метод Л.И. Вигорова. ( 2 вариант) Оборудование, реактивы, материалы. 1) ступки   с   пестиками,   2)   воронки,   3)   вата,   4)   центрифуга,   5)стакан термостойкий, 6) мелкое битое стекло, 7) термометр, 8) листья разных древесных растений. Ход работы. Взвесить   по   3­5   г   листьев   разных   древесных   растений.   Растереть   в ступке с 4 мл воды, для быстрого растирания можно добавить мелкое стекло. При   смыве   ступки   добавить   еще   6   мл   воды.   Более   крупные   частицы разрушенных листьев отцедить через вату или отделить центрифугированием. Полученную   зеленую   жидкость   нагреть   на   водяной   бане   и   отметить температуру,   при   которой   белок   будет   коагулировать.   Установить   ряд устойчивости разных видов древесных растений к высоким температурам.