Методика "Определение температурного порога выживаемости растений в зимний период на примере изучения процесса коагуляции белков цитоплазмы клеток разных растений".

Работа № 3. Определение температурного порога выживаемости растений в зимний период на примере изучения процесса коагуляции белков цитоплазмы клеток разных растений. Методические рекомендации к работе. Растения  нашей  местности в зимние периоды зачастую  подвергаются действию низких температур. Устойчивость к этому фактору определяется генетическими   особенностями   растений,   их   физиологическим   состоянием. Особенно сильно страдают южные растения, теплолюбивые. Это выражается в обратимой или необратимой потере листьями тургора, частичной или полной гибели ассимилирущей поверхности. Страдают, в первую очередь, молодые листья, плохо одревесневшие побеги. Но это явление сглаживается, если в клетках накапливаются защитные вещества – криопротекторы, роль которых выполняют   сасхара,   свободные   аминокислоты,   соли   органических   и неорганических   кислот.   Сахара   образуются   в   процессе   фотосинтеза   и   их накопление   у   определенных   групп   растений   смягчает   или   предотвращает коагуляцию белков. Оборудование, реактивы, материалы. 1) Центрифуга   с   пробирками,   2)   термометр,   3)ступки   с   пестиками,   4) смесь снега и соли 3:1, 5) Сахароза, 6) дистиллированная вода, 7) листья различных растений. Ход работы. Взять   для   сравнения     молодые   листья   неморозостойкого   растения катальпы и морозостойкого тополя, растереть в ступке с 4 мл воды, добавить при   смывании   еще  6   мл,   отделить   обрывки   тканей   центрифугированием   и разделить   зеленый   раствор   в   пробирки.   Заморозить   растворы   во   всех пробирках в снежно­солевой смеси, рассматривая их через каждые 5 минут. Отмечать разницу в замерзании от разных растений. Через каждые 5 минут. Растопить   образовавшийся   лед   и   растворы   опять   отцентрифугировать. Отметить   разницу   в   величине   осадка,   представляющего   коагулированный хлорофилл – белковый комплекс. Опыт   показывает   разное   время   замерзания   растворов   и   разную   степень коагуляции белков у различных растений при замораживании. Повторно вновь приготовить   такой   же   растертый   образец   и   до   замораживания   добавить раствор сахарозы. Затем данную смесь тоже заморозить, пронаблюдать, как происходит   процесс   коагуляции   с   сахарозой   (как   проявляется   защитное действие   сахарозы).   При   фиксировании   результатов   в   таблицу   можно использовать такую градацию: «+» ­ начало замерзания (гомогенная масса с кристалликами   льда),   «++»   ­   частичное   замерзание   (множественные кристаллы   льда),   «+++»   ­   полное   замерзание   (появление   сплошного   слоя льда). Время, мин 2 5 1 5 2 0 Величина осадка, мм 3 0 5 1 0 Вариант Катальпа, без сахарозы Катальпа, с сахарозой Тополь, без сахарозы Тополь, с сахарозой Приготовление охладительной смеси. К трем частям снега или битого льда добавить одну часть поваренной соли.   Изолировать   смесь   в   ведерке   плотной   бумагой,   лед   можно предварительно   наморозить   в     морозилке   или   сложить   в   широкогорлый термос. Для охлаждения можно воспользоваться также сухим льдом.