ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ МОЧИ У ЖИВОТНЫХ
Оценка 4.6

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ МОЧИ У ЖИВОТНЫХ

Оценка 4.6
pdf
13.05.2020
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ МОЧИ У ЖИВОТНЫХ
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ МОЧИ.pdf

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ МОЧИ

 

1. Определение pH

Приготовление рабочего раствора индикатора бромтимолового синего.

Содержимое банки с  бромтимоловым синем перенести в фарфоровую ступку и растереть его и добавить 40 мл 96% этилового спирта ректификата, подогретого до температуры 300С, и тщательно перемешать до полного растворения. После охлаждения до комнатной температуры (18-250С) содержимое ступки перенести в мерный стакан или колбу, довести до дистиллированной водой до 200 мл и тщательно перемешать.

1.1. Ход исследования  К 1—2 мл свежесобранной мочи добрить 1-5 капли рабочего раствора индикатора бромтимолового синего:   

оранжево-желтый цвет соответствует  кислой реакции, рН5,0;

      желтый цвет соответствует слабокислой реакции, рН 6,0-6,5;   

      травянистый цвет соответствует нейтральной реакции, рН-7,0; буровато-зеленый цвет соответствует слабо щелочной реакции, рН- 8,0;

      сине-зеленый цвет соответствует щелочной реакции» рН-9,0.  

       Диапазон измерений рН находится в пределах 5,0-9,0

Примечание: мочу исследуют в первые 2—3 часа после  мочеиспускания.

2. Определение содержания белка

 

2.1. Ход исследования                                                  

В две стеклянные химические пробирки внести по 1,0-2,0 мл профильтрованной или от центрифугированной мочи. В одну пробирку (опытную) внести 2-3 капли 0,85 моль/л раствора сульфосалициловой кислоты. Избыток сульфосалициловой кислоты приводит к растворению белка. Вторая пробирка является контрольной.

На темном фоне сравнить прозрачность обеих пробирок: помутнение в опытной пробирке указывает на наличие белка в исследуемой          моче (положительная проба).       Нижний      предел обнаружение белка в моче составляет 0,033 г/л.

 Примечание: Если реакция мочи щелочная, то перед исследованием ее следует подкислить 2-3 каплями раствора уксусной кислоты 5,2 моль/л (30%).

 

3. Количественное определение (метод   БрандбергаРобертса-Стольникова в модификации с реактивом Ларионовой)

 

Приготовление реактива Ларионовой

Содержимое банки или пакета с хлористым натрием перенести в стеклянную колбу вместимостью 750 мл, добавить 500 мл дистиллированной воды и растворить при нагревании на водяной бане с температурой 50-700С. Полученный раствор охладить до комнатной температуры и профильтровать; к 490 мл фильтрата добавить содержимое бутылки с азотной кислотой и тщательно перемешать.

 

3.1. Ход исследования.              

В стеклянную химическую пробирки внести 1-2 мл реактива Ларионовой, а затем осторожно по стенке пробирки наслоите 1 - 2 мл профильтрованной мочи или подслоить реактив Ларионовой под мочу. Включить секундомер.

Появление тонкого белого кольца на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й минутами указывает на наличие белкам 0,033 г/л в исследуемой моче.

 Если кольцо появляется раньше, мочу следует развести дистиллированной водой и провести повторное определение белка

Степень разведения мочи подбирается  в зависимости от вида первичного кольца: ширины, компактности, времени его появления.

При нитевидном кольце, появившемся  ранее 2 мин., мочу развести в 2 раза; при широком и рыхлом - в 4 раза; при компактном - в 8 раз и т. д

Количество белка вычислить, умножая 0,033 г/л на степень разведения.

Примечание: Иногда белое или желтое кольцо появляется при наличии в  анализируемом образце большого количества уратов. В отличие от белкового  кольца уратное кольцо появляется немного выше границы между двумя жидкостями и растворяется при легком нагревании. 

 

4. КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ

(проба   Гайнеса)

 

Приготовление реактива Гайнеса

Приготовление раствора меди (II) сернокислой 5-водной.

Содержимое банки с медью (II) сернокислой 5-водной перенести в стеклянную колбу вместимостью 750 мл, и добавить 400 мл дистиллированной  воды и тщательно перемешать до полного растворения.

Приготовление раствора натрия гидроокиси                          

Содержимое банки с натрия гидроокисью перенести в стеклянную колбу вместимостью 750 мл, добавить 400мл дистиллированной воды и тщательно перемешать  до полного растворения.

Приготовление  раствора глицерина        

Содержимое бутылки с глицерином перенести в стеклянную колбу вместимостью 250 мл, добавить 200 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать.

Приготовление реактива                 

В стеклянную колбу вместимостью 1000 мл перенести растворы меди сернокислой и натрия гидроокиси, сразу же добавить раствор глицерина и тщательно перемешать.  

                     

4.1.Ход исследования  

В химическую пробирку ввести 3—4 мл реактива Гайнеса, прибавить, 8-12 капель мочи, встряхнуть, прокипятить или поставить в водяную баню на 5 минут. В присутствии сахара появляется  зеленая, желтая, оранжевая   или коричневая окраска жидкости и осадок. Синий цвет указывает на отсутствие сахара.

При необходимости экономии реактива допускается постановка реакции в следующей модификации: 1 каплю мочи и 9 капель, реактива Гайнеса внести в химическую пробирку,  довести до кипения или выдержать в кипящей бане 5 минут.    

Примечание: моча больных диабетом должна исследоваться в первую очередь, т. к. ферменты бактерий и дрожжевых грибов частично      или    полностью разлагают глюкозу.     То      же     самое наблюдается при   бактериурии.                   

Нижний предел обнаружения глюкозы  в моче составляет 5,55 ммоль/л.

5. КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИЛИРУБИНА

Приготовление раствора  бария  хлористого 0,7 моль/л (15%)

75-г          бария         хлористого          перенести   в        мерную      колбу вместимостью 500 мл, добавить 250 мл дистиллированной воды, тщательно перемешать         до      полного      растворения,        довести дистиллированной водой до метки и вновь тщательно перемешать.

 

Приготовление реактива Фуше

1,35          моль/л        (20%)          раствор       трихлоруксусной          кислоты перенести в стеклянную колбу или стакан вместимостью 200 мл, добавить 0,39 моль/л (10%) раствор железа треххлористого и тщательно перемешать.                                          

5.1. Ход исследования

В химическую пробирку внести 10 мл мочи и 5 мл раствора бария хлористого,         тщательно перемешать         и       профильтровать. Хлористый барий осаждает билирубин

Вынутый из  воронки фильтр поместить в чашку Петри и на него нанести каплю реактива Фуше. Появление на этом месте фильтра сине-зеленого,           голубовато-зеленого     или    изумрудного        пятна свидетельствует о присутствии билирубина в моче.

Примечание: Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить ее несколькими каплями уксусной кислоты 5,2 моль/л (30%).

 

6. КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОБИЛИНОИДОВ (бензальдегидная проба Нейбауэра)

 

Приготовление реактива Эрлиха

Содержимое      банки         с        n-диметиламинобензальдегидом перенести во  флакон с соляной кислотой и тщательно перемешать до полного растворения.

6.1. Ход исследования В химическую пробирку  внести 1-2 мл свежевыпущенной мочи, охлажденной до комнатной температуры, добавить 1—2 капли реактива Эрлиха из расчета 1 капля реактива Эрлиха на 1 мл  мочи, тщательно перемешать и включить секундомер.

Окрашивание мочи в красный цвет в течение 30 сек. после  добавления реактива Эрлиха свидетельствует о повышенном содержании уробилиногенов; если окрашивание развивается через 60 сек. или вообще не появляется, то концентрация уробилиногенов в моче в норме.

Примечание. 1. Если определение уробилиногена проводится в длительно стоявшей моче, то реакция может быть отрицательной из-за окисления уробилиногенов в уробилин.

2. Билирубин может мешать определению уробилиногенов, поэтому, если он обнаружен, его следует предварительно удалить, осадив раствором хлористого бария; в  химическую пробирку внести 10 мл мочи, добавить 5 мл раствора хлористого бария, тщательно перемешать и профильтровать.

Нижний предел обнаружения уробилиноидов составляет 3 ммоль/л.

 

7. КАЧЕСТВЕННОЕ  ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВ

 

На фильтровальную бумагу насыпать небольшое количество (на кончике ножа) порошка Лестраде, нанести на него 2-3 капли анализируемой мочи и включить секундомер. При наличии кетонов через 2 мин. порошок окрашивается в розовый, сиреневый или темно-фиолетовый цвет в зависимости от содержания кетонов в моче.

Нижний предел обнаружения кетонов составляет 0,5 ммоль/л.

 

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПО ИССЛЕДОВАНИЮ

Количественное определение (метод

Количественное определение (метод

Приготовление раствора натрия гидроокиси

Приготовление раствора натрия гидроокиси

Приготовление реактива Фуше 1,35 моль/л (20%) раствор трихлоруксусной кислоты перенести в стеклянную колбу или стакан вместимостью 200 мл, добавить 0,39 моль/л (10%) раствор железа треххлористого…

Приготовление реактива Фуше 1,35 моль/л (20%) раствор трихлоруксусной кислоты перенести в стеклянную колбу или стакан вместимостью 200 мл, добавить 0,39 моль/л (10%) раствор железа треххлористого…

Нижний предел обнаружения уробилиноидов составляет 3 ммоль/л

Нижний предел обнаружения уробилиноидов составляет 3 ммоль/л
Скачать файл