Методические указания по теме "Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам"

Методические указания к практическому занятию по дисциплине

«Основы микробиологии и иммунологии»

для студентов специальности: Фармация; 060300, 060301

Сестринское дело; 060500  

Тема: «Определение  чувствительности микроорганизмов к антибиотикам  методом «бумажных дисков»

Цель занятия: изучить методику определения  чувствительности  микроорганизмов к антибиотикам методом бумажных дисков и определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам.

Оборудование:  предметные стекла, сыворотка, изотонический раствор, петли, культура микроорганизмов.

После выполнения практической работы студенты должны уметь:

- определять степень чувствительности микроорганизмов  к антибиотикам.

Студенты должны знать:

-методы определения  чувствительности микроорганизмов к антибиотикам;

- критерии чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

Практическая работа способствует формированию следующих профессиональных компетенций:

ОК- 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес;

ОК-3. Принимать решения в стандартных и нестандартных ситуациях и нести за них ответственность.

ОК-4. Осуществлять поиск и использование информации, необходимой для эффективного выполнения профессиональных задач, профессионального и личностного развития.

ОК-6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством.

ОК-7. Брать на себя ответственность за работу членов команды (подчиненных), за результатом выполнения заданий.

План занятия

I. Входной контроль

II. Инструктаж к практической работе. Демонстрация манипуляций по теме.

III. Самостоятельная работа студентов. Оформление дневников по практике

IV. Отчет о проделанной работе. Выходной контроль

Ход занятия.

I.          Ответьте на вопросы входного контроля:

1. Что представляют собой антибиотики?

2.какое явление лежит в основе действия антибиотиков?

3.Каковы источники получения антибиотиков?

4.Как различаются антибиотики по механизму антимикробного действия?

5.Каков характер действия антибиотиков?

6.Какие возможные осложнения со стороны макроорганизма при антибиотикотерапии?

7.Какие существуют методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам?

II.   Инструктаж к практической работе

Используя в работе   методические указания, изучите методику определения чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков и определите чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

III. Самостоятельная работа студентов:

1.       Изучить методику определения чувствительности бактерий к антибиотикам  методом дисков .

Взвесь  изучаемой культуры засевают «газоном». В качестве посевного материала можно использовать суточную бульонную культуру или 1 миллиардную микробную взвесь, приготовленную по оптическому стандарту мутности № 10.  Засеянные чашки  подсушивают 30-40 минут при комнатной температуре. Затем на поверхность засеянного агара пинцетом накладывают бумажные диски, пропитанные растворами различных антибиотиков. Каждый диск слегка прижимают браншами пинцета, чтобы он плотно прилегал к поверхности агара. Диски накладывают на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии 2 см от края чашки. Одну чашку можно использовать для изучения чувствительности одного штамма к 4-5 антибиотикам.

Засеянные чашки с нанесенными на них дисками помещают в термостат при 37⁰С  на 18-24 ч. Чашки ставят вверх дном.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ.  Действие антибиотиков оценивают по зоне задержки роста вокруг диска.  Диаметр зон задержки роста микробов вокруг дисков определяют с помощью линейки, включая  диаметр самого диска в миллиметрах.

В зависимости от диаметра зоны задержки роста различают степень чувствительности испытуемого штамма: чувствительные, малочувствительные и устойчивые (отсутствие зоны).

Рисунок 1. Определение чувствительности микроорганизмов методом дисков

Таблица 1 – Определение степени чувствительности  микроорганизмов к антибиотикам по величине зоны  отсутствия роста

Приготовление стандарта мутности.

В стандарте мутности № 10  содержится  1 млрд. микробов в 1 мл. Чтобы получить микробную взвесь,  для этого в пробирку с выросшей  на скошенном агаре  культурой наливают  изотонический раствор натрия хлорида и, вращая пробирку между ладоням, смывают культуру с поверхности среды. Часть полученной  переносят  стерильной пипеткой в стерильную пробирку.  Затем сравнивают густоту полученной  микробной взвеси с оптическим стандартом мутности. В случае необходимости микробную  взвесь разводят, прибавляя изотонический раствор натрия  хлорида до нужной мутности. Если  мутность  полученной микробной взвеси совпадает с мутностью оптического стандарта, то количество микробных тел  в ней  соответствует номеру стандарта.

2.      Определить степень  чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

IV.   Выходной контроль. Тестовый опрос.

Методические рекомендации студентам к практическому занятию

по теме: «Определение  чувствительности микроорганизмов к антибиотикам  методом «бумажных дисков»».

1. Что представляют собой антибиотики?

2.какое явление лежит в основе действия антибиотиков?

3.Каковы источники получения антибиотиков?

4.Как различаются антибиотики по механизму антимикробного действия?

5.Каков характер действия антибиотиков?

6.Какие возможные осложнения со стороны макроорганизма при антибиотикотерапии?

7.Какие существуют методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам?