Методика сбора мочи у животных для анализов

МЕТОДИКА СБОРА МОЧИ ДЛЯ АНАЛИЗОВ

Для анализа мочи имеет значение и время ее сбора. Для клинического анализа лучше всего использовать утреннюю порцию мочи, около 200 мл, взятую до кормления животных. 

Для сбора суточной мочи можно пользоваться обычными эмалированными или фаянсовыми горшками, а также стеклянными банками емкостью 500 мл. 

 Посуда, предназначенная для сбора мочи, должна быть безукоризненно чистой и сухой, так как от этого зависит точность проводимых исследований. Растворение осадка солей на дне сосудов лучше всего производить концентрированной или разведенной соляной кислотой (можно пользоваться неочищенной или отработанной соляной кислотой). Посуду нужно мыть с помощью ершика и тщательно прополаскивать от кислоты. Для устранения запаха разлагающейся мочи можно споласкивать мочеприемники и сосуды, где она хранилась, 0,5% раствором марганцовокислого калия и слабым раствором соляной кислоты.

Для клинического анализа предпочтительно использовать свежевыпущенную порцию мочи. 

      При длительном стоянии на воздухе моча начинает изменять свои  физикохимические  свойства,  происходит  ее ощелачивание с  выделением  аммиака,   что  

способствует в дальнейшем выпадению кристаллов аморфных фосфатов и трипельфосфатов. Пробы лучше исследовать не позднее 1,5 ч с момента взятия. Если такой возможности нет, то мочу сохраняют в холодильнике при 4°С, консервируют добавлением к ней химических веществ (тимол, 40%-ный формальдегид, хлороформ, бензол и др.). Добавление химических веществ к пробам ограничивает возможность химического анализа, а некоторые из анализов становятся невыполнимыми. Например, при консервировании проб мочи тимолом в ней нельзя определить белок.

За сутки до сбора анализа необходимо исключать из рациона животных продукты с яркой окраской (например, морковь, свекла) и, по возможности прекратить дачу лекарственных средств.

Клинический анализ мочи у животных, страдающих почечными заболеваниями, необходимо повторять раз в пять дней, при патологиях сердечно-сосудистой системы – раз в десять дней, в том случае, если нужно проследить за обменом жидкости в организме или изучить содержание в ней  некоторых веществ, сбор мочи осуществляется в течение суток.

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩИХ СВОЙСТВ МОЧИ

Свойства нормальной мочи некоторых животных

Лошадь. Количество мочи у здоровых лошадей составляет за сутки от 3 до 6, максимум 10 л. Цвет се от светло-желтого до светло-бурого; запах резкий, напоминает запах прелого сена; она мутна, слизистой консистенции, содержит значительное количество солей: реакция щелочная, в редких случаях амфотерная; удельный вес 1,025-1,055. В отстоявшейся моче появляется обильный осадок, состоящий главным образом из углекислого кальция, иногда щавелевокислого и сернокислого кальция, а также гиппуровой кислоты; поверхностный слой вследствие окисления фенола темнее. Темная окраска этого слоя становится все гуще и постепенно захватывает часть сродного, а иногда и нижнего слоя.

Крупный рогатый скот. Количество мочи за сутки составляет от 6 до 12, максимум 25 л. Цвет ее от светло-желтого до светло-коричневого, прозрачный; запах слабый специфический (затхлый); консистенция водянистая:

реакция щелочная, редко амфотерная; удельный вес 1,025-1,050. В скудном осадке встречается щавелевокислый, углекислый и сернокислый кальций, гиппуровая кислота. При обильном кормлении моча животных приобретает темно-красную или буро-красную окраску. Отстоявшаяся моча темнеет, но слабее, чем у лошади.

Верблюды. Суточное количество мочи достигает 8-15 л. В свежевы-пущенном состоянии цвет ее от светло-желтого до буро-желтого, прозрачная консистенция жидкая, водянистая; запах резкий, специфический; реакция щелочная; удельный вес 1,030-1,060.

Свиньи. Количество мочи за сутки у взрослых свиной составляет 2-4 л. Она светло-желтого цвета, чаще прозрачная, неприятного острого запаха, водянистой консистенции; реакция обычно щелочная, иногда амфотерная; удельный вес 1,018 1,022. Осадок незначительный; чаще всего в нем обнаруживают щавелевокислый кальцин, редко — трипельфосфаты.

Собаки. Крупные собаки за сутки выделяют 0,5-2 л, средние - 400 мл - 1 л, мелкие –20-200 мл мочи. Цвет ее от светло-желтого до янтарно-желтого, чаще всего прозрачный; консистенция жидкая; издает запах чеснока или мясного отвара; реакция кислая; удельный лес 1,020-1,050. Осадок обычно незначительный, содержит щавелевокислый кальций, иногда мочевую кислоту, редко трипельфосфаты.

 

При исследовании мочи придерживаются следующей схемы, определяя

ее:

•         физические свойства: количество, цвет, прозрачность, консистенцию, запах, удельный вес;

•         химические свойства: pH реакцию, содержание белка, углеводов, кровяных и желчных пигментов, индикана, ацетона, креатинина, аскорбиновой кислоты и, кроме того, примесь лекарственных веществ;

•         микроскопические особенности: неорганизованные и организованные осадки.

 

Исследование физико-химических свойств мочи.

 

Физико-химическое исследование  мочи включает в себя определение следующих ее свойств:

•         суточный диурез (количество выделяемой в сутки мочи);

•         относительная плотность (удельный вес);

•         цвет;

•         прозрачность;    консистенция;

•         запах.

 

Суточный диурез у животных можно точно определить, собирая мочу в  специальные мочеприемники. Суточный диурез в норме составляет 60 – 75% общего количества потребленной жидкости.  

Суточный диурез. Количество выделяемой за сутки мочи в норме зависит от количества потребляемой животным жидкости, от степени физической нагрузки, от температуры окружающей среды, кормления и т.д. У больных животных изменение количества мочи может быть связано с отклонениями в функциональной способности почек, мочеточников, мочевого пузыря, уретры, а также многими другими причинами (нарушения водно-электролитного баланса, гормональные нарушения, патологии ЦНС, ЖКТ, сердечно-сосудистой системы и т.д.). При заболеваниях количество выделяемой за сутки мочи может увеличиваться или уменьшаться, а также ее выделение может прекратиться полностью.

 

Полиурия – увеличение количества выделяемой за сутки мочи.

•         прием большого количества жидкости;

•         сахарный и несахарный диабет;

•         рассасывание отеков, транссудатов и экссудатов;

•         нефросклероз;

•         в период выздоровления после лихорадочных состояний

 

 Олигурия – уменьшение количества выделяемой за сутки мочи.

•         ограниченный прием жидкости;

•         лихорадочные состояния;

•         нефронефриты;

•         рвота, понос;

•         токсикозы;  сердечно – сосудистые заболевания; шоковые состояния.

 

 Анурия – полное прекращение выделения мочи, выделяют истинную (секреторную) анурию, связанную с нарушением функции мочеобразования  и  ретенционную     (экскреторную)   анурию,      возникающую     вследствие наличия механических препятствий к выделению мочи.

•         большая потеря жидкости;

•         тяжелые заболевания почек;

•         менингиты;

•         перитониты;

•         отравления солями тяжелых металлов;

•         закупорка мочевыводящих путей камнями, опухолью, при отеке слизистой мочеточников или мочеиспускательного канала (ретенционная анурия).

Цвет мочи в норме зависит от концентрации растворенных веществ, особенно стеркобилиногеновых тел и др. У жвачных моча от светло-желтого до светлокоричневого цвета. У лошадей от бледно- до буро-желтого цвета. Свиньи выделяют светло-желтую мочу. У плотоядных моча имеет желтый или светло-желтый цвет. В хранящихся пробах мочи верхний слой ее темнеет из-за окисления хромогенов. При скармливании животным красной свеклы моча становится красной.

У больных животных может меняться окраска мочи. Светлая моча со слабым бледно-желтым оттенком служит показателем того, что она мало концентрированная (при хронической почечной недостаточности). Слабое окрашивание отмечают при полиурии вследствие цирроза почек, сахарного и несахарного диабета, кетоза, гипопротеинемии.

Интенсивно-желтый цвет бывает при высокой концентрации, обусловленный сильным потоотделением, сердечной декомпенсацией, длительной лихорадкой и повышением содержания стеркобилиногеновых тел. 

Желто-зеленый до темно-коричневого цвет мочи часто бывает при наличии в ней уробилиногеновых тел. 

Темно-коричневой с красноватым оттенком она становится в связи с присутствием гемоглобина, крови, миоглобина, большого количества индикана.

Белая, непрозрачная моча, с сероватым оттенком становится от примеси гноя при сильном цистите и пиелонефрите. Наличие в моче большого количества жира придает ей молочно-белый цвет. 

Некоторые лекарства также могут изменять цвет мочи: после внутривенного введения метиленового синего моча становится синей или зеленой; препараты карболовой кислоты придают коричневатый или черный цвет; сантонин — зеленый (при кислой моче), красный (при щелочной моче); после дачи фенатиазина моча красная.

Более интенсивную окраску имеет концентрированная моча с кислой реакцией. Нормальными красящими веществами мочи являются урохром, уробилин и др.

Гиперхромурия – повышенная интенсивность окраски мочи, наблюдается при  уменьшении количества ее выделения за счет потери жидкости при поносах, рвоте, Более интенсивную окраску имеет  концентрированная моча с кислой реакцией. Нормальными красящими веществами лихорадочных состояниях.

Гипохромурия – снижение интенсивности окраски мочи, наблюдается при различных видах полиурии, особенно при сахарном и несахарном диабете, нефросклерозе.

Необычную окраску моча может приобретать вследствие поедания животным

овощей и фруктов с яркой окраской (свекла, морковь).

 

Изменение окраски мочи:

•         темно-желтый с зеленоватым оттенком (―цвет пива‖) – отмечается при различных видах желтухи и обусловлен повышенным содержанием желчных пигментов.

•         розово-красный  отмечается при употреблении некоторых лекарственных препаратов (амидопирин, сантонин, сульфонал), а также при отравлении карболовой кислотой.

•         цвет ―мясных помоев  ― отмечается при гематурии и гемоглобинурии, обусловленных органическими заболеваниями

•         молочно-белый цвет мочи наблюдается при липурии

•         цвет от зеленовато-желтого до грязно-коричневого отмечается при пиурии

•         красный  цвет характерен для макрогематурии (свежая кровь при инфаркте почки, почечной колике)

•         темно-бурый цвет указывает на наличие микрогематурии, гемоглобинурии

(мочекаменная      болезнь,      гемолитическая       почка)      или       уробилиногенурии

(гемолитическая анемия)

•         черный цвет мочи отмечается при меланосаркоме

 

•         Прозрачность ночи. Свежая моча прозрачная (за исключением однокопытных). Постоявшая моча мутнеет, образуется как бы облачко, состоящее из мукоида (муцина) - слизи мочевыводящих путей и щелочных фосфатов. В пробах кислой мочи выкристаллизовываются ураты. У лошадей из-за наличия в моче Са(НСОз)₂  при хранении образуется не растворяемый карбонат кальция (СаСОз), и поверхность мочи покрывается тонкой пленкой. Мутность свежей мочи может быть обусловлена присутствием в ней большого количества лейкоцитов, эритроцитов, бактерий, солей, слизи, эпителиальных клеток и капелек жира. Уточнить причину помутнения мочи помогает микроскопическое исследование ее осадка.

•         Консистенция мочи. У всех видов животных (кроме однокопытных) моча жидкая, водянистая. У лошадей, мулов, ослов моча слизистая вследствие примеси муцина и при переливании растягивается длинными нитями. Жидкой и водянистой моча становится при полиурии. При воспалении мочевых путей, половых органов и уменьшении диуреза моча вязкая, иногда по внешнему виду напоминает желе. При тяжело протекающих уроцистите и пиелонефрите моча слизеподобная.

•         Запах         мочи          специфичен         для    каждого     вида животных.          Чем концентрированнее моча, тем сильнее ее запах.

При полиурии моча почти лишена запаха. Появление запаха аммиака в свежей моче свидетельствует о развитии гнилостной микрофлоры при параличе и парезе мочевого пузыря, тяжелом уроцистите, закупорке уретры. Гнилостный запах отмечают при распаде тканей мочевого пузыря, тяжелом уроцистите, распаде опухоли в мочевых путях. Запах свежих фруктов в моче выявляют при кетозах.

 

•         Относительная плотность мочи. Измерение относительной плотности мочи - наиболее удобный метод исследования концентрационной способности почек. Этот показатель определяют урометром. Относительная плотность колеблется в следующих пределах (г/мл, кг/л): у крупного рогатого скота - 1,015 - 1,045, у овец и коз - 1,015 - 1,05, у свиней - 1,01 - 1,03, у лошадей - 1,02 - 1,05, у собак -1,02 -1,05, у кошек - 1,01 - 1,04, у кроликов -1,01 - 1,015. На относительную плотность мочи влияет количество потребляемой воды. При приеме большого количества воды она снижается. Тяжелая мышечная работа, выделение большого количества пота способствуют повышению относительной плотности.

Таблица 4.

 

Запах мочи	Патология
Отсутствует или слабый	Полиурия
Аммиачный	Развитие гнилостной микрофлоры  в мочевых путях при парезе и параличе мочевого пузыря, тяжелом уроцистите, закупорке уретры
Гнилостный	Некротический распад тканей мочевого пузыря при  уроцистите, распаде опухолей мочевыводящих путей
Запах свежих фруктов,	Кетоз
ацетона

 

Понижение относительной плотности мочи может быть обусловлено ослаблением концентрационной способности почек экскреторной функции (при хронических нефрите, пиелонефрите и нефросклерозе). В результате утраты способности концентрировать мочу относительная плотность постоянно низкая (1,002—1,004), такое состояние называют гипостенурией. В случаях развития перитонита, грудной и брюшной водянки на стадии рассасывания транссудата снижается относительная плотность мочи, появляется полиурия. Эти признаки при указанных патологических явлениях рассматривают как прогностически благоприятные.

Повышение относительной плотности мочи в сочетании с полиурией наблюдают при сахарном диабете, в сочетании с олигурией — при обезвоживании вследствие длительного поноса, рвоты, лихорадки. При заболевании почек это отмечают при остром гломерулонефрите.

Присутствие большого количества белка и сахара приводит к повышению относительной плотности мочи.

  Гиперстенурия  - увеличение  относительной плотности выделяемой мочи.

•          ограничение потребления жидкости;

•          потеря жидкости (рвота, понос);

•          сахарный диабет;

•          олигурия;

•          глюкозурия, протеинурия, альбуминурия,             

•          аминоацидурия;

•          токсикоз беременных.

   Гипостенурия - уменьшение  относительной плотности выделяемой мочи.

•          обильное потребление жидкости;

•          острое поражение почечных канальцев;

•          несахарный диабет;

•          ХПН (хроническая почечная недостаточность);

•          злокачественная гипертензия;       голодание;        полиурия.

    Изостенурия – длительное выделение мочи с удельным весом, равным удельному весу первичной мочи вне зависимости от объема выделяемой мочи, наблюдается в тяжелых случаях поражения почек и является плохим прогностическим признаком.

Химическое исследование мочи

 

При химическом исследовании мочи определяют рН, содержание белка, протеаз, сахара, кетоновых тел, кровяных пигментов, миоглобина, индикана, желчных пигментов и желчных кислот.

Для проведения химического исследования выпускают бумажные тесты, позволяющие моментально выполнить полуколичественный анализ на нитраты, кетоновые тела, белок, глюкозу, билирубин, гемоглобин и т. д.

•         Определение рН мочи. Показатель рН устанавливают только в свежеполученной моче, так как рН при хранении мочи изменяется. Наиболее просто можно определить его с помощью индикаторной бумаги (Рифан, Phan, универсальная). Более точное определение может быть проведено с помощью рНметра.

рН мочи зависит от состава кормов, то есть соотношения кислых и щелочных эквивалентов. У травоядных моча щелочной или нейтральной реакции, у плотоядных — кислая. Длительное нарушение соотношения кислых и щелочных эквивалентов в кормах приводит к изменению показателя рН мочи.

Во время голодания моча становится кислой. Кислую мочу обнаруживают при тяжелых ацидозах, изнурительных поносах, заболеваниях, сопровождающихся длительной лихорадкой. У плотоядных при алкалозе, понижении калия в крови реакция мочи становится щелочной. В результате фосфатурии рН мочи сдвигается в щелочную сторону. При патологии мочевой системы рН мочи может существенно изменяться за время нахождения ее в мочевом пузыре. Это связано с развитием аммиачного брожения, в процессе которого образуется карбонат аммония. Резко щелочная моча бывает при тяжелом уроцистите, осложненном гнилостной микрофлорой,  при рассасывании экссудата и транссудата.

 

Кислая реакция: - кормление с высоким содержанием белка;

•         сахарный диабет;

•         подагра;

•         лихорадочные состояния

•         тяжелой степени почечная недостаточность;

•         обезвоживание;

•         гипокалиемия;

•         прием кортикостероидов и т.д. Щелочная реакция:

•         алкалоз (метаболический или респираторный);        кормление с высоким содержанием углеводов;

•         гиперкалиемия;

•         ХПН;

•         воспалительные процессы мочевого пузыря;

•         повышение кислотности желудочного сока;

•         рвота

   

Определение белка в моче основано на физическом или химическом осаждении его.

Методы определения белка. Определение белка в моче производится с помощью качественных и количественных методов исследования. Все реакции на белок основаны на его осаждении. Непременным и строго обязательным условием при определении белка в моче является предварительное ее фильтрование и подкисление, в случае, если моча имела щелочную реакцию.

Качественное определение белка в моче осуществляется многими способами.

Наиболее широко применяются пробы с кипячением, с сульфосалициловой кислотой (проба Роча-Вильяма),  проба Геллера и проба Ларионовой.

Проба с кипячением. Профильтрованную мочу кипятят в присутствии нескольких капель 10% раствора уксусной кислоты. При наличии белка в пробирке появляется муть.

Проба с сульфосалициловой кислотой (проба Роча-Вильяма). Эту пробу можно ставить с малыми количествами мочи : 1мл мочи и 3 мл 3% сульфосалициловой кислоты или 2 мл мочи и 2 – 4 капли 20% раствора этой кислоты.

Во всех случаях при  наличии белка в пробах мочи появляется опалесцирующая муть. Чувствительность пробы 0,015 % белка (0,015г в 1000мл 

Проба Геллера. Эта проба проводится путем наслоения на 50% раствор азотной кислоты 1-2 мл профильтрованной мочи. Реакция может быть положительной при наличии в моче не менее 0,033% белка (0,33 г в 1000мл мочи). Положительной реакция считается при наличии белого кольца на границе двух сред. Белое кольцо может появиться и при наличии в моче уратов, в этих случаях оно располагается значительно выше границы двух сред и при нагревании мочи легко исчезает.

Проба Ларионовой. Реактив для обнаружения белка готовят на насыщенном растворе поваренной соли с 1% раствором азотной кислоты. Этот метод экономичен и дает довольно четкие результаты.

Количественное определение белка в моче производится после установления его наличия в моче с помощью качественных реакций. В настоящее время в клинической практике количественное определение белка в моче проводится колориметрическим методом, в основе которого лежит определение степени помутнения мочи, содержащей белок, при реакции с сульфосалициловой кислотой.. Удобным является также и метод Робертса-Стольникова, основанного на том, что 50% азотная кислота выявляет белок в моче, начиная с концентрации 0,33 г/л. 

 

Протеинурия (альбуминурия) -  появление белка в моче, причем не только альбуминов, но и  глобулинов. 

Протеинурии    могут          быть почечного (ренальные        протеинурии)       и внепочечного (экстраренальные протеинурии) происхождения. 

Причем последние подразделяются на преренальные и постренальные протеинурии, а почечные протеинурии делятся на органические и функциональные, которые бывают физиологическими и патологическими.

 

Ренальные протеинурии возникают в результате поступления белка в мочу из почек, при этом функциональные ренальные протеинурии  характеризуются непродолжительным течением, появление белка в моче носит непостоянный характер. Развитие функциональной протеинурии, как правило, связано с определенными физическими состояниями (изменение температуры окружающей среды, эмоциональные и физические нагрузки и т.д.) Органические почечные протеинурии связаны со структурными изменениями в паренхиме  почек, они носят постоянный и более выраженный характер.

Экстраренальные протеинурии связаны с патологическими состояниями, не затрагивающими  структуру самих почек. Так, преренальная или застойная протеинурия развивается у животных, страдающих сердечной недостаточностью в стадии декомпенсации и возникает вследствие нарушения кровообращения и застойных явлений во внутренних органах.   

 

	Ренальные  протеинурии  (почечного происхождения).   1. функциональные         физиологические (алиментарная, маршевая, эмоциональная, холодовая и др.);           патологические. 2.органические (истинные) Экстраренальные протеинурии  (внепочечного происхождения).   1.          преренальные (надпочечные, застойные) протеинурии 2.          постренальные (послепочечные, ложные) протеинурии

Постренальная или ложная протеинурия наблюдается в результате попадания в мочу примесей из мочевыводящих и половых путей при их воспалительных заболеваниях.

 

Ренальная протеинурия.

Функциональная        физиологическая          протеинурия        обнаруживается после употребления в пищу большого количества не денатурированного белка (например яичный белок) – алиментарная протеинурия, после усиленных мышечных нагрузок – маршевая протеинурия, при сильном охлаждении, перегревании, при беременности (особенно в последние недели перед родами, при некоторых стрессовых состояниях и  у новорожденных.

Функциональная        патологическая   протеинурия                 может наблюдаться        у истощенных     животных   с        лордозом    –        ортостатическая, лордотическая, перемежающаяся протеинурия; белок в моче может появляться при длительном стоянии, при резкой смене положения тела.

Органическая  (истинная почечная) протеинурия

•         острый и хронический гломерулонефрит;

•         нефрозы;

•         нефросклерозы;

•         врожденные аномалии почек;

•         интоксикации;

•         ожоги;

•         тубулопатии

Экстраренальная протеинурия Преренальная (застойная) протеинурия.

•         сердечная недостаточность в стадии декомпенсации Постренальная (ложная) протеинурия.

•         цистопиелиты;

•         вульвовагиниты;

•         уретриты;

•         опухоли мочевыводящих путей.

Определение сахара в моче. На сахар исследуют свежую мочу. При хранении мочи в тепле сахара разлагаются.

В моче здоровых животных  глюкоза содержится в минимальных количествах, которые не определяются обычными качественными пробами.   

Выделение сахара с мочой называется Глюкозурия - выделение сахара с мочой  зависит от трех факторов: 1) концентрация сахара в крови;2) количества профильтровавшейся через клубочки первичной мочи;3) количества глюкозы, подвергшейся реабсорбции в почечных канальцах. 

При нормальной функции почек глюкозурия наступает в тех случаях, когда уровень сахара в крови понимается выше ―сахарного порога‖. Сахарный порог во многом зависит от функции почек. Повышение его наблюдается при некоторых хронических заболеваниях почек,  когда объем клубочкового фильтрата резко снижается и в канальцы попадает меньшее количество глюкозы. 

Почечный порог может повышаться при введении питуитрина (вазопрессина), адреналина, паратгормона, под действием которых резко уменьшается просвет кровеносных сосудов, повышается кровяное давление, изменяется водно-солевой обмен и повышается отделение мочи.. Понижение сахарного порога наблюдается при почечном диабете, когда вследствие нарушения процесса реабсорбции глюкозы в почечных канальцах глюкозурия может возникать даже при нормальном уровне сахара в  крови.

Появлению сахара в моче обычно предшествует повышение его содержания  в крови. Но не всегда гипергликемия и связанная с ней глюкозурия рассматриваются как патологическое  явление.

Физиологическая глюкозурия возникает:

•      при потреблении большого количества углеводов;

•      стрессовые состояния;

•      болевые ощущения (рефлекторно развивается гликогенолиз, в связи с выбросом катехоламинов);

•      длительное голодание.             Патологическая глюкозурия возникает:

                 Инсулярная (панкреатогенная)

•      сахарный диабет;

•      острый панкреатит;

                Экстраинсулярная (внепанкреатическая)  центрального                  генеза

•      черепно-мозговые травмы;

•      опухоли головного мозга;

•      менингиты;

•      лихорадочные состояния;

•      отравления морфином, хлороформом, фосфором, стрихнином.

           Экстраинсулярная (внепанкреатическая)   гормональная

•      тиреотоксикоз;

•      акромегалия;

•      гиперплазия коры надпочечников;

•      синдром Иценко-Кушинга.

           Экстраинсулярная (внепанкреатическая) ренальная

•      почечный диабет

В моче животных, кроме глюкозы, могут встретиться и другие виды сахаров – сахароза, галактоза, фруктоза, пентоза, лактоза и др. Кроме того могут выделяться и другие вещества, обладающие редуцирующими (восстановительными) свойствами, например витамин С, креатинин, мочевая кислота, которые могут давать  положительные качественные реакции на сахар.

Качественное определение сахара в моче производят с помощью проб Мора, Гайнеса, Ниландера, Фелинга, Бенедикта  и др.

Проба Мора. Моча, содержащая сахар, при кипячении с 10% водным раствором  гидрооксида натрия или калия последовательно окрашивается в желтый, буро-красный, темно-бурый и черный цвет.

Проба Гайнеса. Проба позволяет определить сахар по наличию осадка закиси меди коричнево-зеленого или красного цвета в зависимости от количества сахара, присутствующего в моче.

Проба Ниландера. Реактив Ниландера состоит из 4г сегнетовой соли, 2г азотистого висмута и 10г гидрооксида калия в 100мл дистиллированной воды. Реакции Ниландера существенно мешают различные вещества, присутствующие как в нормальной, так и в патологической моче, что существенно снижает ценность этого метода.

Количественное определение сахара в моче удобнее всего производить с помощью поляриметра или путем титрования мочи.

 Кетоновые (ацетоновые) тела.  К кетоновым телам, выделяющимся с мочой относятся ацетон, ацетоуксусная и бета оксимасляная кислота. С мочой здоровых животных  в течение суток выделяется минимальное количество кетоновых тел (не более 20-50 г в сутки), которое не обнаруживается обычными качественными пробами в клинических лабораториях. 

Известно, что белки, жиры и углеводы могут расщепляться в организме до конечных продуктов обмена – углекислоты и воды. Расщепление жиров в тканях происходит под воздействием липолитических ферментов (тканевых липаз) с образованием глицерина и высших жирных кислот. При окислении жирных кислот образуются промежуточные продукты обмена: ненасыщенные жирные кислоты, окси- и кетокислоты и простые жирные кислоты. Жирные кислоты дегидрируются (теряют водород) и превращаются в ненасыщенные кислоты, к которым присоединяется вода, образуя бета-оксикислоту. Эта кислота вновь дегидрируется, превращаясь в бетакетокислоту, которая, присоединив молекулу воды, расщепляется на так называемую  ―активную‖ уксусную кислоту. Эта ― активная ― уксусная кислота через цикл трикарбоновых кислот окисляется до углекислоты и воды.  

При нарушении некоторых звеньев этого цикла ацетон может образоваться в результате декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты. Ацетоуксусная кислота в свою очередь может образовываться из двух молекул активной уксусной кислоты. Ацетон может образовываться из ацетоуксусной кислоты и при нарушении процесса расщепления некоторых аминокислот таких как фенилаланин, тирозин и лейцин. 

Образование промежуточных продуктов обмена ацетоуксусной и бета оксимасляной кислот происходит в печени. Затем эти кислоты поступают в ткани, где они окисляются в дальнейшем до конечных продуктов обмена – углекислоты и воды. При недостаточном поступлении в организм углеводов, голодании или нарушении их использования организмом (например при диабете), изменяется процесс окисления недооксиленных продуктов обмена,. в связи с чем они появляются в моче.

Кетонурия – повышенное выделение кетоновых тел с мочой встречается:

•                продолжительное голодание;

•                сильное возбуждение;

•                сильное переутомление;

•                патологии ЦНС;

•                лихорадка;

•                синдром Иценко – Кушинга;

•                сахарный диабет;       гиперинсулинизм;      тиреотоксикоз.

          При значительной кетонемии изменяется и КЩС в организме. В результате развивается ацидоз, следствием которого является ацидотическая кома с судорогами, специфической ацидотической рвотой и общим тяжелым состоянием.

В   моче имеется небольшое количество кетоновых тел, которые не улавливают качественными реакциями. У лошадей в норме их содержится 0,06-0,66 ммоль/л, у коров - 0,3 -1,1, у овец - 0,59 - 1,46 ммоль/л. 

•                Определение крови и кровяных пигментов. В моче могут быть обнаружены      кровь,         кровяные    пигменты   (гемоглобин        и       его        дериваты    — метгемоглобнн, сульфгемоглобин, гемосидерин), а также миоглобин.

В моче часто одновременно находят кровь и гемоглобин, поэтому в пробе после оседания форменных элементов надосадочная жидкость остается красной.

Наличие крови в моче именуют гематурией. Визуально примесь крови к моче можно определить, если концентрация эритроцитов в ней составляет более 25 000 в 1 мкл. Моча в этом случае красная, осадок ее со сгустками крови. Такое состояние называют макрогематурией. Если примесь крови не вызывает окрашивания мочи, то говорят о микрогематурии. Ее чаще находят при микроскопии осадка мочи.

Клиническое значение обнаружения крови в моче. Гематурия может быть вследствие кровотечения в органы мочевой системы. Кровь может примешиваться из половых органов и из фекальных масс.

Гематурии бывают почечные, внепочечные и смешанные. Кровь часто встречается при мочекаменной болезни. При этом количество крови в утренней моче меньше, чем днем и вечером, после движения животных. У крупного рогатого скота гематурия развивается при послеродовой гемоглобинурии, отравлении капустой; у телят - при водной интоксикации после выпаивания чрезмерно большого количества воды.

Обнаружение крови — важный симптом острого нефрита и его обострения.

Кровотечение отмечают при опухолях, гематомах, венозном застое в почках, опухолях    в        мочевом     пузыре,      остро          протекающих      инфекциях, вследствие гиповитаминоза С, К и других геморрагических диатезов.

В случаях тяжело протекающего пиелонефрита, острого уроцистита кровь в моче бывает с примесью большого количества лейкоцитов.

Важное значение имеет установление места кровотечения. Для этого применяют пробу трех сосудов. В начале мочеиспускания кровь собирают в первый сосуд, в середине - во второй и в конце — в третий. При кровотечении из уретры кровь бывает только в первом, при кровотечении из мочевого пузыря - в третьем, при других источниках кровотечения моча кровавая во всех трех сосудах.

Кровь в моче может быть в сочетании с кровяными пигментами и миоглобином. Если они присутствуют в большом количестве, то вызывают ее покраснение и по бурение. Сущность обнаружения крови и кровяных пигментов в моче химическим путем основана на пероксидазном действии гемоглобина. Качественное определение крови и кровяных пигментов в моче проводят с помощью бензидиновой пробы, с гваяковой настойкой и др.

Количественное определение крови в моче не имеет большого значения. Клиническое значение определения гемоглобина в моче. Появление гемоглобина в моче называют гемоглобинурией. Она возникает в результате усиленного гемолиза в кровяном русле, вследствие которого развивается гемоглобинемия. При превышении почечного порога в отношении гемоглобина начинается его выделение с мочой. Для установления гемоглобинурии необходимо доказать химическими реакциями наличие в моче гемоглобина и отсутствие гематурии, что определяют микро- и макроскопически. Гемоглобинурия бывает при отравлениях экстрактом мужского папоротника, в случаях сильных ожогов, при кровепаразитарных болезнях (бабезиоз, пироплазмоз, нутталиоз и другие пироплазмидозы).

Присутствие миоглобина в моче приводит к окрашиванию ее в красный или бурый         цвет. Миоглобин          появляется при    обширных мышечных травмах и миоглобинурии.

 Определение индикана. Индикан — калиевая соль индоксилсерной кислоты. Он образуется в результате гнилостных процессов в кишечнике и распада белков тканей организма. Показанием на определение индикана служит подозрение на усиление гнилостных процессов в кишечнике или распад тканей в связи с абсцессами и т. д.

Качественное определение индикана. Методики основаны на двух принципах:

превращение индикана под действием кислоты в индоксил, который в последующем окисляется до синего или красного индиго (проба Обермайера и Яффе); индоксил под действием FeCI₂ соединяется с тимолом, давая цветную реакцию (реакция Розе).

Количественное определение индикана возможно реакцией Розе.

Клиническое значение определения индикана. Индикан в моче обнаруживают в небольших количествах. У высокопродуктивных коров при стойловом содержании индикан в моче колеблется от 22 до 44 г/л. К концу стойлового периода концентрация индикана возрастает.

Увеличение индикана в моче, при котором качественные пробы становятся положительными, называют индиканурией. При патологии индиканурия может быть кишечного и тканевого происхождения. Кишечная индиканурия возникает при ослаблении моторики желудочно-кишечного тракта, непроходимости кишечника, воспалительных процессах в нем, особенно при развитии гнилостной микрофлоры и при перитоните. Тканевая индиканурия развивается при распаде опухолей, гангрене легких, абсцессах и септическом состоянии.

 Определение билирубина. Билирубин в моче определяют с помощью качественных, а также количественных проб.

Характеристика методов определения билирубина. Для качественного определения билирубина используют методы Розина и Фуше. Они основаны на превращении билирубина под действием окислителей в биливердин, который имеет изумрудно-зеленый цвет. Проба Розина непригодна для выявления билирубина в моче у крупного рогатого скота. Для этой цели нужно использовать пробу по Франку с метиленовым синим.

Количественные исследования билирубина выполняют по методам Клегорна и Грофа в модификации Вита.

Значение количественного определения билирубина. В моче здоровых животных билирубин не выявляют качественными пробами. Если билирубин обнаруживают качественными пробами, такое состояние называют билирубинурией. Почки выделяют только прямой билирубин.

Особое значение имеет выявление билирубина при диагностике желтух. Билирубинурия сильно выражена при механической (обтурационной) желтухе, которая обусловлена закупоркой желчных путей. В них происходит застой желчи, в результате чего повреждаются желчные капилляры и прямой билирубин попадает в кровь, заносится в почки и выделяется с мочой. Исчезновение билирубина в моче при данной желтухе указывает на восстановление желчных путей.

Механическая желтуха возникает при наличии камней в желчных ходах, при сдавливании и закупорке желчного протока и т. д. Билирубинурию отмечают также при паренхиматозной желтухе, при которой прямой билирубин проникает в кровь в результате разрушения печеночных клеток. Он также с кровью попадает в почки и выводится с мочой. Паренхиматозную желтуху обнаруживают при гепатитах у плотоядных, травоядных в результате отравлений четыреххлористым углеродом, у лошадей — при инфекционном энцефаломиелите.

При гемолитической желтухе билирубинурия не развивается. В крови не накапливается прямой билирубин, другая же разновидность билирубина — непрямой билирубин — не выделяется с мочой. Таким образом, билирубинурия свойственна только механической и паренхиматозной желтухе.

 Желчные пигменты. Желчные пигменты – билирубин и биливердин – появляются в моче только при патологии. В норме желчные пигменты содержатся в моче в незначительных количествах и качественными пробами не определяются. Желчные пигменты могут появиться в моче лишь в том случае, если количество их в крови превысит так называемый почечный порог билирубина (более 2 мг%). 

Моча в присутствии желчных пигментов приобретает темный желто-зеленый цвет.

Билирубин и биливердин образуются в клетках РЭС печени, селезенки и костного мозга при разрушении эритроцитов. Расщепление гемоглобина начинается с разрыва альфа-метиновой связи порфиринового кольца с образованием вердгемоглобина. От молекулы вердгемоглобина происходит отщепление железа и глобина, после чего образуется совершенно качественно новое соединение – гемобилирубин или непрямой билирубин. Непрямой билирубин представляет собой пигмент оранжевого цвета, плохо растворимый в воде, циркулирующий в крови в виде тесного комплекса с альбуминами и не проходящий через почечный фильтр (в реакции ван ден Берга не дает прямой реакции). При определении непрямого билирубина в крови его сначала нужно освободить от комплекса с альбуминами, что достигается методом осаждения   сывороточных  белков спиртом или другими реактивами.

Непрямой билирубин выделяется клетками РЭС и с током крови попадает в печень. В гепатоцитах он теряет свой белковый компонент и преобразуется в прямой билирубин, или холебилирубин, связанный с глюкуроновой кислотой. В норме образовавшийся в гепатоцитах прямой билирубин поступает сначала по желчным ходам в желчные протоки, а оттуда в желчный пузырь. В кишечнике под действием ферментов некоторых кишечных бактерий билирубин восстанавливается в мезобилирубин и затем в стеркобилиноген и уробилиноген. Часть уробилиногена и стеркобилиногена всасывается кишечной стенкой и через воротную вену поступает в печень, где полностью окисляется  в билирубин, который выделяется в составе желчи.. Большая часть стеркобилиногена выделяется  с калом. Стеркобилиноген окисляется на воздухе в стеркобилин, который является нормальным пигментом кала. Небольшая часть прямого билирубина всасывается из кишечника в кровь и через нижнюю полую вену по кругу кровообращения поступает в почки в виде уробилиногена, который окисляется до уробилина и выделяется с мочой.

Появление желчных пигментов в моче может быть следствием повышенной билирубинемии за счет увеличения количества прямого билирубина в сыворотке крови.  С мочой может выделяться только прямой билирубин. Непрямой билирубин даже при очень высоком содержании в крови с мочой не выделяется, так как связан с белками сыворотки и не может преодолеть почечный фильтр.

Билирубинурия – появление прямого билирубина в моче:  

•         механическая  желтуха;

•         паренхиматозная  желтуха.

 

•         Определение       уробилиногеновых     (уробилиновых) тел.

Уробилиногеновые и уробилиновые тела - производные билирубина (уробилиноген, стеркобилиноген, а-уробилиноген и третий уробилин). Уробилиногеновые тела при соприкосновении с атмосферным кислородом переходят в уробилиновые тела: уробилин, стеркобилин, а-уробилин и третий уробилин (от образования дериватов билирубина).

Качественные методы определения уробилиногеновых и уробилиновых тел. Определение уробилиногеновых тел проводят по методике Нейбауера, а уробилиновых тел - по Богомолову или Шлизингеру. У коров применяют пробу Флоренса - Камарницина. Чаще приходится определять уробилиновые тела, так как в лабораторию доставляется моча, хранившаяся некоторое время.

Клиническое значение определения уробилиногеновых и уробилиновых тел. Моча животных окрашена стеркобилиногеном, который в норме не обнаруживается качественными пробами. Повышенное выделение уробилиногеновых тел с мочой, когда они улавливаются с помощью качественных реакций, называют уробилиногенурией. Она свидетельствует о поражении печени при паренхиматозной желтухе.

При гемолитических состояниях, кишечных заболеваниях (непроходимость, энтероколиты) в кишечнике образуется большое количество уробилиногеновых тел, но они, попадая в печень, расщепляются и не достигают кровеносного русла. Стеркобилиноген, образованный в большом количестве в кишечнике, всасывается по геморроидальным венам, попадает в почки и выводится ими в повышенном количестве с мочой.