Выпускная квалификационная работа студента КГБПОУ КрасМТ Бабаян Асмик Вачиковны "Роль современных микробиологических и молекулярно-генетических диагностик туберкулеза

Роль современной микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза у лиц старше 20 лет

Автор: Бабаян Асмик Вачиковна, студент КГБПОУ КрасМТ

Научные руководители: Мингалеева Галина Минахасымовна

                        Роппельт Лилия Амировна

Основное преимущество молекулярных-генетических методов в том, что они являются «быстрыми» методами, позволяющими получить результаты в относительно короткий временной период. Заключение о наличии микобактерий в диагностическом материале делается на основании выявления ДНК бактерий, а вывод о лекарственной устойчивости (ЛУ) – на основании выявления мутаций в генах.

Цель исследования: выявить роль и особенности организации и проведения микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза у взрослых

Предмет исследования: роль современных методов и технологий микробиологической и молекулярно-генетической для диагностики туберкулеза

Гипотеза: мы предполагаем, что в настоящее время для диагностики туберкулеза у взрослых особенно актуальны микробиологические (LED-технология, культивирование на жидкой питательной среде в автоматизированной системе и т.д.)   и молекулярно-генетические технологии, такие как ПЦР (полимеразная цепная реакция), картриджная технология, биологические микрочипы, Хаин-тест.

Задачи исследования:

1)      Провести теоретический анализ литературных источников по данной проблеме.

2)      Изучить особенности методов и технологий, позволяющих точно диагностировать туберкулез, а также определить лекарственную устойчивость у пациентов.

3)      Сформировать выборку и подобрать методики для проведения исследования. Провести анализ полученных данных.

4)      Составить рекомендации для пациентов, оформить в виде буклета.

Методы исследования: Теоретический анализ литературы и периодических изданий по проблеме; опрос, интервью; анализ полученных данных. Исследование проходило на базе краевого туберкулезного диспансера. Из проведенного опроса фтизиатров мы выяснили, что высокочувствительными и максимально результативными методами диагностики являются:

1.                Квантифероновый тест. Один из новых способов, который считают хорошей альтернативой Манту и диаскинтесту. В основе лежит исследование венозной крови на специфические интерфероны, которые образуются в крови только при наличии патогенных штаммов микобактерий. Главное преимущество – в отсутствии ложноположительной реакции. Недостаток данного способа – невозможность отличить латентный туберкулез от туберкулеза в активной форме.

2.                ПЦР (полимеразная цепная реакция). Считается самым точным видом исследования. Кроме фрагментов ДНК палочки Коха можно с помощью данного метода узнать расположение воспалительного процесса в организме. Получение положительного результата методом ПЦР позволяет в течение одного рабочего дня установить наличие микобактерии туберкулёза в диагностическом материале.

3.                Серологическое исследование. Выявляет специфические антитела, которые образуются в организме как ответ на появление инфекции. Если в анализе обнаружены противотуберкулезные антитела, это указывает на туберкулезную инфекцию. Правда, даже отрицательная реакция не может указать на отсутствие палочки Коха, поскольку на начальной стадии болезни иммунитет может не вырабатывать антитела.

Также из интервью мы узнали, что в диспансере внедрены: автоматизированная система ВАСТЕС 960 и Hain-test (Хаин-тест) - экспресс-метод молекулярно-генетической диагностики множественной лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза, который также позволяет проводить дифференциацию между нетуберкулезными микобактериями и вакцинным штаммом МБТ. Важно, чтобы результаты анализов крови рассматривались врачом только вкупе с остальными клиническими симптомами и данными других исследований для подтверждения окончательного диагноза.

Также мы выяснили, что современные бактериологические способы определения чувствительности микобактерий к противотуберкулезным препаратам на жидкой среде с помощью автоматизированной системы ВАСТЕС 960 дают возможность получить результаты, хорошо сопоставимые с традиционными методами абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена. Наибольшая согласованность данных наблюдалась для изониазида (87%), рифампицина (86%) и стрептомицина (90%), а наименьшая - для этамбутола (70%). Высокая степень совпадения двух методов по определению лекарственной чувствительности микобактерий к препаратам первого ряда позволяет рассматривать их как взаимозаменяемые и отдавать предпочтение автоматизированному как более объективному, стандартизованному и ускоренному.

Накопленный опыт в лечении туберкулеза свидетельствует о трудностях диагностики этого заболевания. Применение одного метода часто бывает недостаточно, поэтому существует необходимость использования различных приемов из арсенала инструментальных и лабораторных способов. Следует учитывать, что каждый из методов имеет свои недостатки, а их сочетание может привести к более достоверному заключению.

1.     Гуревич Г. Отразить удар палочки Коха/ Г. Гуревич // БЕЛТА [Электронный ресурс]. - 2020. - Режим доступа: http://www.belta. by/ru/actualinterviev? id=503474. - Дата доступа: 22.12.2020.

2.     Суркова Л.К. Основные пути оптимизации микробиологической диагностики туберкулеза в современных условиях/ Л.К. Суркова // Медицинские новости. - 2018. - №8. - с.10-16.

3.     Скачано с www.znanio.ru