При диагностике заболеваний в ветеринарной практике часто определяют состояние системы крови: исследуют физические свойства, химический и морфологический состав крови, костномозговой пунктат, селезенку и функцию кроветворения.
Картина крови тонко отражает действие на кроветворные органы различных физиологических и патологических факторов. При некоторых заболеваниях (лейкозы, анемия) результаты анализа крови играют решающую роль в установлении диагноза и определении прогноза.
Цель занятия. Освоить технику взятия крови, научиться определять время ее свертывания, вязкость и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).
Объекты исследования и оборудование. Коровы, лошади, свиньи, собаки, овцы.
Иглы для взятия крови, ножницы, стерилизатор, глазные пипетки, предметные и часовые стекла, темные флаконы с рабочими стандартными растворами сульфата меди, цитрата натрия, трилон Б, гепарин, спирт, эфир, 5%-й спиртовой раствор йода, вата, аппараты Панчен- кова, эритроседиометр, вискозиметр ВК-4.
Взятие крови. Кровь для исследований лучше брать у животных утром до кормления.
В малых количествах кровь получают из мелких кровеносных сосудов уха; у пушных зверей — из лапки (пальца), кончика хвоста; у кур — из гребня или сережек; у гусей и уток — из ступни конечностей; у мышей — из хвоста.
В больших количествах кровь у крупного рогатого скота, лошадей, овец, коз, верблюдов, буйволов, яков, оленей берут из яремной вены; у свиней — из хвоста (отрезают его кончик или пересекают кровеносные сосуды на вентральной поверхности хвоста), из глазного венозного синуса, крупных сосудов уха или краниальной полой вены; у собак — из вены сафена или подкожной вены предплечья; у песцов и лисиц — из плантарной вены, у кроликов — из ушной вены; у морских свинок — из сердца; у кур — из кожной локтевой вены, плечевой артерии на внутренней поверхности крыла или из сердца; у рыб — из хвостовой артерии. Место взятия крови выстригают, кожу дезинфицируют спиртом или спирт-эфиром.
При взятии капиллярной крови используют иглу Франка, перо Джаннера, копьевидное перо или инъекционную иглу. Первую каплю крови удаляют, а следующую берут для анализа. При взятии крови из яремной вены используют кровопускательные иглы (Боброва, Каспера, Сайковича, Афанасьева и др.) (рис. 7.1). Вену предварительно пережимают ниже места прокола (на переходе верхней трети шеи в среднюю) большим пальцем левой руки, резиновым жгутом, специальными щипцами или с помощью других приспособлений.
Получение плазмы. В кровь, чтобы она не свертывалась, добавляют антикоагулянты: из расчета на 10 мл крови — 30 мг цитрата натрия или калия, 15 мг оксалата натрия, 30 мг фторида натрия, 50 ЕД гепарина или 0,2 мл 10%-го раствора трилона Б. Затем стабилизированную кровь центрифугируют 10 мин при 3000 мин'1, после чего плазму отбирают пипеткой, оставляя на дне пробирки форменные элементы.
Рис. 7.1. Иглы для взятия крови:
1 — Афанасьева; 2—5 — Боброва; 6 — инъекционная
Получение сыворотки. Кровь собирают в пробирки без антикоагулянта, выдерживают несколько часов при комнатной температуре или помещают на 0,5—1 ч в термостат. Свернувшуюся кровь отделяют от стенки пробирки стеклянной палочкой. В заключение пробирку центрифугируют 10 мин при 3000 мин1 и отделившуюся сыворотку отбирают пипеткой.
Определение физических свойств крови. В клинической практике чаще определяют время свертывания крови, ее вязкость и скорость оседания эритроцитов.
Определение времени свертывания крови. Как правило, используют методы Ли — Уайта и Бюркера.
Метод Ли — Уайта: каплю свежевзятой крови помещают на предметное стекло, которое каждые 10 с наклоняют. Момент, когда капля при наклоне стекла не будет менять свою форму, соответствует началу свертывания крови.
МетодБюркера:на парафинированное предметное или часовое стекло помещают каплю нативной крови и затем каждые 30 с пытаются оторвать ее от стекла с помощью иглы скарификатора или инъекционной иглы. Появление первых непрочных нитей фибрина соответствует началу свертывания, а момент, когда за нить фибрина удается оторвать кровяной сгусток от стекла, — концу свертывания.
На время свертывания крови оказывают влияние многие факторы (температура среды, способ получения крови, размер и форма сгустка и др.), что необходимо учитывать при исследовании этого показателя.
У здоровых животных значения показателя следующие, мин: крупный рогатый скот 6—9; овцы 2—3; лошади 10-13; свиньи 3-4; собаки 2—3; куры 3—5.
Ускоренную свертываемость крови отмечают при гемоглобинемии, крупозной пневмонии; замедленную — при анемиях, гемофилии, лейкозе, холемии, нефрите, геморрагических диатезах, скорбуте. Кровь совершенно не свертывается при сибирской язве, удушье.
Определение вязкости крови. Вязкость — один из главных показателей, характеризующих реологические свойства крови; отражает внутреннее сцепление плазмы, обусловленное клеточным составом и веществами, в ней находящимися. Вязкость крови определяют с помощью вискозиметра ВК-4 (рис. 7.2).
Капиллярную трубку вискозиметра, снабженную краном, заполняют стабилизированной кровью до метки «0», а вторую трубку до аналогичной метки — дистиллированной водой. Вискозиметр укладывают горизонтально на стол и открывают кран. Через мундштук осторожно всасывают воздух так, чтобы столбик крови продвинулся до отметки «1», при этом вода тоже будет двигаться по капилляру. Если столбик воды достигнет отметки «5», а столбик крови — «1», то коэффициент вязкости составит 5.
У здоровых животных коэффициенты вязкости следующие: у крупного рогатого скота 4,2—5,2; овец 4,2—5; лошадей 3,9—4,8; свиней 4,8—6,2; собак 4,7—5,5; кур 4,5-5,5.
Повышение вязкости крови наблюдают при усиленном потоотделении, венозных застоях, острых экссудативных процессах и при патологиях, приводящих к обезвоживанию организма. Понижение вязкости крови характерно для анемий.
Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). В ветеринарной практике используют методы Неводова и Панченкова.
Рис. 7.2.
Вискозиметр ВК-4: 1 — капилляр для заполнения водой;
конец
Метод Т. Г. Па нченкова:в градуированный на 100 делений капилляр Панченкова набирают до метки «Р» (деление 50) 5%-й раствор цитрата натрия и переносят его на часовое стекло. Затем в этот же капилляр набирают дважды кровь до метки «К» (деление 0) и оба раза выдувают ее на часовое стекло. Кровь, тщательно перемешанную с раствором цитрата натрия, вновь набирают в капилляр до метки «К». Капилляр ставят в штатив строго вертикально. СОЭ учитывают через 1 ч, при необходимости через 24 ч и выражают в миллиметрах.
У здоровых животных СОЭ составляет, мм: у крупного рогатого скота 0,5 — 1,5; овец 0,5— 1; коз 0,3—1; лошадей 40—70; свиней 2—9; собак 2-6; кур 2-3.
Метод А.П. Неводова: в эритроседио- метр — пробирку, градуированную на 100 делений, — вносят на кончике скальпеля около 0,02 г оксалата натрия, затем кровь из вены до метки «0». Пробирку закрывают резиновой пробкой, осторожно переворачивают 5-10 раз, смешивая кровь с антикоагулянтом, и ставят в штатив. СОЭ учитывают по высоте столбика плазмы через 15, 30, 45, 60 мин и при необходимости через 24 ч (табл. 7.1).
Таблица 7.1
Скорость оседания эритроцитов у здоровых животных (метод А.П. Неводова)
Вид |
Высота столбика плазмы мм, через |
||||
животных |
15 мин |
30 мин |
45 мин |
60 мин |
24 ч |
Крупный |
0,1-0,3 |
0,3-0,4 |
0,4-0,6 |
0,6-0,8 |
1-2 |
рогатый скот Овцы |
0,1-0,3 |
0,3-0,5 |
0,5-0,7 |
© 7 г-~ ©" |
1-2 |
Лошади |
30-40 |
52-56 |
56-60 |
60-65 |
65-70 |
Свиньи |
2-5 |
6-10 |
15-25 |
20-35 |
25-40 |
Собаки |
0-0,4 |
0,5-1,2 |
1,5-2,3 |
2.0-3,5 |
3-5 |
Куры |
0-0,1 |
1-3 |
2,5-4,0 |
4,,0-6,5 |
5-7 |
Изменения СОЭ, обнаруживаемые при патологии, имеют диагностическое, прогностическое значение и служат показателем эффективности лечения.
Увеличена СОЭ при различных анемиях, инфекционных (мыт, сап, чума, контагиозная плевропневмония лошадей, кровопятнистая болезнь, туберкулез и др.) и инвазионных (пироплазмоз, нутталиоз, трипанозамоз и др.) болезнях, при воспалительных процессах в организме, новообразованиях и др.
Замедлена СОЭ при переутомлении, избыточном потоотделении, полиурии, диареи, коликах, гастроэнтеритах, механической и паренхиматозной желтухе, механическом илеусе, инфекционном энцефаломиелите, стахиботриотоксикозе и др.
Материалы на данной страницы взяты из открытых источников либо размещены пользователем в соответствии с договором-офертой сайта. Вы можете сообщить о нарушении.